GB/T 37649-2019 化妆品中硫柳汞和苯基汞的测定高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法检测标准

　　1 范围
　　本标准规定了化妆品中硫柳汞和苯基汞的高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱测定方法的原理试剂和材料、仪器设备、测定步骤、结果计算、回收率与精密度、允许差等内容。
　　本标准适用于膏、霜和乳液类化妆品中硫柳汞和苯基汞含量的测定。
　　本标准方法硫柳汞和苯基汞的检出限(以汞计)为：0.3mg/kg，定量限(以汞计)为1.0mg/kg。
　　2 规范性引用文件
　　下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其*新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
　　GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
　　3 原理
　　样品在经过提取后，经高效液相色谱仪分离，电感耦合等离子质谱仪检测，外标法定量。
　　4 试剂和材料
　　除非另有规定，所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682 规定的一级水。
　　4.1 硫柳汞：纯度不小于96.0%。硫柳汞的中文名称、INCI名称(国际化妆品原料名称)/英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量和结构式参见附录A中的表A.1。
　　4.2 苯基汞：纯度不小于98.0%。苯基汞的中文名称、INCI名称/英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量和结构式参见附录A中的表A.1。
　　4.3 L-半胱氨酸：纯度不小于98.0%。
　　4.4 甲醇：色谱纯。
　　4.5 乙酸铵。
　　4.6 乙酸铵水溶液(c=60m mol/L，含有0.1%L-半胱氨酸)：分别准确称取4.625g乙酸铵，1.000gL半胱氨酸，用水定容至1000mL，混匀。经0.45μm水系滤膜过滤后，于超声水浴中超声脱气30min，备用。
　　4.7 混合标准工作溶液：分别准确称取适量的硫柳汞和苯基汞标准品，用甲醇(4.4)溶解定容，制备成0.50g/L(以汞计)的硫柳汞和苯基汞标准储备溶液(-18℃以下避光保存，有效期6个月)。移取适量标准储备溶液于100mL的容量瓶中，用乙酸铵水溶液(4.6)定容至刻度，作为混合标准工作溶液，参考线性范围为0.00μg/L、2.50μg/L、5.00μg/L、12.5μg/L、25.00μg/L、50.00μg/L(以汞计)。
　　5 仪器设备
　　5.1 高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用仪。
　　5.2 电子天平：感量为0.01g和0.0001g。
　　5.3 离心机：转速不低于5000r/min。
　　5.4 超声清洗仪
　　5.5 孔径0.45μm有机滤膜。
　　6 测定步骤
　　6.1 样品处理
　　称取0.2g(*至0.001g)样品置于15mL具塞刻度管中，用10mL甲醇(4.4)溶解，超声提取15min，用乙酸铵水溶液(4.6)定容至15mL，混合均匀，置于5000r/min高速离心机上离心5min，经0.45μm滤膜过滤，滤液作为待测样液，备用。可依据需要对待测液进行浓缩或稀释。
　　6.2 仪器参考条件
　　6.2.1 高效液相色谱参考条件
　　高效液相色谱参考条件如下：
　　a) 色谱柱：C18反相色谱柱或相当者(4.6μm×150mm，5μm)；
　　b) 流动相：流动相A：甲醇；流动相B：乙酸铵水溶液[(4.6)；高效液相色谱梯度洗脱程序参见表1；
　　c) 流速：1.0mL/min；
　　d) 柱温：25℃；
　　e) 进样量：20μL。
　　6.2.2 电感耦合等离子质谱参考条件
　　电感耦合等离子质谱参考条件如下：
　　a) 射频(RF)功率：1400W；
　　b) 载气流速：0.54L/min；
　　c) 辅助气流速：0.28L/min；
　　d) 反应气比例：80%Ar+20%O2(体积分数)；
　　e) 采样模式：时间积分；
　　f) 分析时间：900s；
　　g) 检测元素：202Hg。